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Q5 High Fidelity DNA Polymerase

Extreme Fidelity in PCR.

Q5 High-Fidelity DNA Polymerase ist der Maßstab in der PCR und verbindet extreme Genauigkeit und höchste Zuverlässigkeit! Q5 DNA Polymerase ist ~280x genauer als Taq DNA Polymerase (siehe Tabelle1) und besitzt die beste Fehlerkorrektur aller erhältlichen PCR Polymerasen.

Q5 DNA Polymerase ist eine neuartige „proofreading“ Polymerase, die mit einer zusätzlichen Proteindomäne fusioniert wurde – engineered for performance!

Die zusätzliche Sso7d DNA binding domain sorgt für eine dramatische Steigerung der Prozessivität und verbessert die Geschwindigkeit, die Genauigkeit sowie die Zuverlässigkeit der PCR-Reaktion.

Das neuentwickelte Q5 Puffersystem erlaubt überragende Ergebnisse unabhängig vom GC-Gehalt der eingesetzten Template DNA. Mit Q5 DNA Polymerase erhalten Sie auf jedem DNA Material zuverlässig und ohne aufwendige Reaktionsoptimierungen exzellente Performance, egal ob AT-reich oder GC-reich!

Polymerase Fidelity –
What is it and what does it mean for your PCR?
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Q5 DNA Polymerase Genes in Space

Nur ein Reaktionspuffer für optimale Performance:

Der neue Q5 Reaktionspuffer ist optimiert für exzellente Performance unabhängig vom GC-Gehalt Ihres Templates. Egal ob AT-reich oder GC-reich, mit dem Q5 Reaktionspuffer erhalten Sie hohe Ausbeuten und hohe Spezifitäten. Und für Templates >65% GC geben Sie einfach den beiliegenden GC-Enhancer dazu – fertig! Q5 DNA Polymerase ist auch als Hot Start Variante sowie als praktischer Master Mix erhältlich: Die Master Mix Variante enthält vorgemischt alle notwendigen PCR-Komponenten inkl. Enzym, dNTPs, Mg++ für besonders bequeme und zuverlässige Reaktionen.

Q5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase

Im Gegensatz zu anderen Polymerasen, die chemisch oder mittels Antikörper inhibiert werden, nutzt NEBs Q5 Hot Start DNA Polymerase ein synthetisches Aptamer. Dieses kleine Molekül bindet durch nicht-kovalente Interaktionen an der Polymerase. Es blockiert deren Aktivität bei Raumtemperatur und verhindert so unspezifische Nebenprodukte. Die Polymerase wird während des „normalen“ Aufheizvorgangs aktiviert – eine zusätzliche Hitze-Aktivierung ist nicht notwendig. Als Anwender profitieren Sie von schnellen, kurzen und simplen Protokollen. Q5 Hot Start DNA Polymerase ist daher optimal für höchste Spezifität und bequeme Handhabung.

Q1 Genauigkeit (Fidelity)
„Ultra-Fidelity“ dank einer Genauigkeit von ~280x höher als Taq DNA Polymerase

Q2 Zuverlässigkeit
Exzellente Spezifität und hohe Ausbeuten ohne aufwendige Reaktionsoptimierung

Q3 Einsatzbereich
Überragende Performance auf allen DNA Templates (egal ob AT-reich oder GC-reich)

Q4 Geschwindigkeit
Extrem kurze Extensionszeiten (nur 10sec/kb auf Plasmid-DNA)

Q5 Länge der Amplikons
Zuverlässige Amplifikationen bis 20kb Länge (Plasmid-DNA) und 10kb auf komplexen gDNAs

Q5 DNA Polymerase besitzt die höchste Genauigkeit aller getesteten PCR Polymerasen:


1 We continue to investigate improved assays to characterize Q5’s very low error rate to ensure that we present the most accurate fidelity data possible (Potapov, V. and Ong, J.L. (2017) PLoS
ONE. 12(1): e0169774.).

2 PCR-based mutation screening in lacZ (NEB), lacI (Agilent) or rpsL (Life)
3 Takagi et al (1997) Appl. Env. Microbiol. 63, 4504-4510.

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Videos

Warum Q5 High-fidelity Polymerase?

Sie sind nicht sicher, warum Q5® Ihre beste Wahl für Amplifikationen von GC-reichen Targets mit höchster Genauigkeit ist? Wissenschaftler von NEB zeigen Ihnen, warum wir Q5® als „ultra-high fidelity polymerase“ bezeichnen.

Wichtige Tipps zur Q5 Polymerase

Hier sind ein paar kurze Tipps um die besten Ergebnisse mit der Q5® High-Fidelity DNA Polymerase zu erzielen.

Mehr Video Tutorials finden Sie auf NEBs YouTube Kanal.

Technische Details

Q5 DNA Polymerase ist der neue Industriestandard in Genauigkeit und Performance!

Die Q5 und die Q5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerasen liefern zuverlässige Ergebnisse unabhängig vom GC Gehalt des Templates

Amplifikation von Bereichen humaner gDNA mit unterschiedlichen GC-Gehalten mit der Q5 bzw. Q5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase. Die Q5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase Reaktionen wurden bei Raumtemperatur angesetzt. Es wurden je 30 PCR Zyklen verwendet, die Visualisierung der Ergebnisse erfolgte mittels microfluidic LabChip® Analyse

Mit Q5 High-Fidelity DNA Polymerase und anderen kommerziell erhältlichen Polymerasen wurden unterschiedlichste genomische Targets amplifiziert. Alle Polymerase wurden gemäß den Herstellerangaben verwendet, inkl. der Verwendung spezieller GC-Puffer bzw. -Enhancer. Ausbeute und Reinheit der Produkte wurden quantifiziert und in der Abbildung mittels Farbe und Größe der Punkte dargestellt. Ein großer, dunkelgrüner Punkt stellt die beste Performance dar.

Die Amplifikation unterschiedlicher Targets auf humaner gDNA zeigt die herausragende Performance der Q5 High-Fidelity DNA Polymerase unabhängig vom GC-Gehalt. Alle Reaktionen wurden mit 20 ng Template und 30 PCR Zyklen durchgeführt, dabei wurde je nach Herstellerangaben verfahren.

Die Amplifikation unterschiedlicher Targets auf humaner gDNA zeigt die herausragende Performance der Q5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase unabhängig vom GC-Gehalt. Alle Reaktionen wurden mit 20 ng Template und 30 PCR Zyklen durchgeführt, dabei wurde je nach Herstellerangaben verfahren.

Q5 DNA Polymerase übertrifft alle anderen derzeit erhältlichen High Fidelity DNA Polymerasen!

Tabelle 1: Vergleich verschiedener HighFidelity DNA Polymerasen


1 We continue to investigate improved assays to characterize Q5’s very low error rate to ensure that
we present the most accurate fidelity data possible (Potapov, V. and Ong, J.L. (2017) PLoS
ONE. 12(1): e0169774.).

2 PCR-based mutation screening in lacZ (NEB), lacI (Agilent) or rpsL (Life)
3 Takagi et al (1997) Appl. Env. Microbiol. 63, 4504-4510.
4 Template not specified.
5 Simple templates include plasmid, viral and E. coli genomic DNA. Complex templates include plant,
human and other mammalian genomic DNA.

6 Values provided by individual manufacturers.

Kundenbewertungen

Ausgewählte Kundenrezensionen

„Mutageneseprotokolle über Blunt-End Ligationsstrategien funktionierten schnell, mit hoher Ausbeute und ohne erkennbaren Fehler! Top!!! Ich habe meine Strategie zur Mutageniesierung komplett auf Q5 Hot-Start umgestellt!“

Sebastian Franken, Life-Science-Inkubator GmbH, Bonn

„Seit Monaten konnte keine Amplifikation bei einer Overlap PCR erzielt werden. Doch Dank der Q5 Hot Start DNA Polymerase gelang der Schritt sofort. Wir werden uns jederzeit wieder für dieses Produkt entscheiden! Vielen Dank NEB!“

Sonja Windmann, Virologie, Uniklinik Essen

„Die Testung ergab spezifischere Amplifikation (weniger unspezifische Nebenbanden) und vergleichbare oder höhere Ausbeuten.“

Peter Banasik Genexpress GmbH, Berlin

„Bei Sequenzierung bisher noch keine Fehler gefunden!“

N.N. MPI für Entwicklungsbiologie Tübingen

„Wir haben ein ziemlich langes Amplicon (das murine UTY-Gen, ca. 3700 bp), das uns bei der Klonierung und unserem PCR öfter Schwierigkeiten gemacht hat (…). Bisher haben wir immer dafür die Phusion Hot Start II High Fidelity benutzt. Mit dem Q5 Hot Start High Fidelity haben wir jetzt sogar ein besseres Ergebnis erzielt und sparen dabei noch sehr viel Zeit (fast 2 Stunden), denn mit der Phusion hat die PCR-Reaktion des 3700bp-langes Gen ca. 4:13 Stunden gedauert.“

N.N. Hämatologie/Onkologie, Uniklinik Münster

„Die Hot-Start-Variante der Q5 funktioniert merklich. PCR-Ansätze unter sonst gleichen Bedingungen lieferten mehr Ausbeute bei der Hot-Start-Variante als bei der normalen Q5 oder Phusion.“

N.N. Buchmann Institut, Uni Frankfurt

„Ich habe die Gratismuster an zwei „Sorgenkindern“ meiner Standard PCRs getestet (...) Mit der Q5 Hot Start Polymerase bekam ich endlich zuverlässig und reproduzierbar meine Banden (...) Herzliche Grüße und nochmal besten Dank für die Proben!“

Doris Glass, Physiologie II, Uniklinik Bonn

„Die Polymerase konnte ohne grosse Umstellung des Protokolls verwendet werden (addaptiert zu DreamTaq). Dies ging besser als mit Pfu!“

N.N. Klinische Chemie & Klinische Pharmakologie, Uniklink Bonn

„Im Vergleich zu anderen Polymerasen ist kein unerwünschter Hintergrund (z.B. unerwünschten Banden) aufgetreten und die erwarteten Banden sind eindeutig amplifiziert worden.“

N.N. Biochemie und Biologie, Universität Potsdam

„Amplifikation aus Single Worm Nematodenlysat hat gut funktioniert. Dies ist erfreulich, da nicht selbstverständlich.“

N.N. Zoologie, Uni Köln

Bestellinformationen

PRODUKT Art.Nr.: GRÖSSE PREIS
Q5 High Fidelity DNA Polymerase M0491S/L 100/500 units 94,- € / 416,- €  NEB Shop_icon
Q5 High Fidelity 2X Master Mix M0492S/L 100/500 units 153,- € / 612,- €  NEB Shop_icon
Q5 Hot Start High Fidelity DNA Polymerase M0493S/L 100/500 units  110,- € / 499,- € NEB Shop_icon
Q5 Hot Start High Fidelity 2X Master Mix M0494S/L 100/500 units  178,- € / 712,- € NEB Shop_icon
Auch erhältlich als Q5 High-Fidelity PCR Kit:
Q5 High-Fidelity PCR Kit E0555S/L 50/200 rxns  91,- € / 308,- € NEB Shop_icon
Auch erhältlich als Next-Gen-Seq optimierte Formulierung:
NEBNext High Fidelity 2X PCR Master Mix M0541S/L 50/250 rxns  90,- € / 360,- € NEB Shop_icon

Passend dazu:

PRODUKT Art.Nr.: GRÖSSE PREIS
Deoxynucleotide Solutions, Mix N0447S 8 µmol each 59 € NEB Shop_icon
Deoxynucleotide Solutions, Mix N0447L 40 µmol each 236 € NEB Shop_icon

Stand: 02.01.2017

Phusion® is a registered trademark and property of Thermo Fisher Scientific.

Phusion® DNA Polymerase was developed by Finnzymes Oy, now a part of Thermo Fisher Scientific.

AccuPrime™ is a trademark of Life Technologies, Inc.

Platinum® is a registered trademark of Life Technologies, Inc.

PfuUltra™ is a trademark of Agilent Technologies, Inc.

Q5®, Deep Vent™ and 9°N™ are trademarks of New England Biolabs, Inc.

Vent™ is a registered trademark of New England Biolabs, Inc.

LabChip® is a registered trademark of Caliper Life Sciences, part of Perkin Elmer, Inc.

Weiterführende Informationen finden Sie unter Technische Ressourcen oder auf neb.com