RNA Isolation leicht gemacht
Das „universelle“ Monarch Kit für die einfache RNA Extraktion aus Zellen, Gewebe, Blut, Bakterien, Pflanzen…
Für Ihre Total RNA Extraktion empfehlen wir Ihnen das beliebte, universelle Monarch Total RNA Miniprep Kit. Egal ob Sie RNA aus pflanzlichen Zellen, tierischem Gewebe, menschlichem Blut oder Bakterien isolieren – Sie nutzen dieses Kit für jedes Material.
Mit unserem optimierten Säulchen/Puffer-Design isolieren Sie saubere, gDNA-freie Total RNA und erhalten einen repräsentativen, unverfälschten Total-RNA Pool inkl. small RNAs <200 nt mit Ausbeuten von bis zu 100 µg. Die präparierte RNA ist von exzellenter Qualität und daher kompatibel mit allen nachfolgenden, anspruchsvollen Anwendungen inkl. NGS-RNA-Seq, cDNA, RT-qPCR, Northern-Blots etc.
Dabei ist das Monarch Total RNA Miniprep Kit besonders günstig, denn es enthält neben den Säulchen und Puffern bereits alle „zusätzlichen“ Reagenzien für die RNA Isolation, wie Proteinase K, DNase I und das RNA Protection Reagent zur sicheren und schonenden Lagerung Ihrer gewonnenen, wertvollen RNA.
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„Außerdem habe ich auch noch den Monarch Total RNA Miniprep Kit getestet (...) und ich muss sagen ich bin begeistert: funktioniert für unsere Pflanzensamples besser als der RNeasy plant Kit von Qiagen (...). Sogar aus nicht homogenisierten Tomatenwurzeln haben wir eine gute Menge RNA herausbekommen.“ Mitarbeiterin, BOKU, Abteilung für Pflanzenschutz in Tulln |
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Video: RNA Isolation Protocol
- Flexibel: Ein „universelles“ Kit für die Total-RNA Isolierung
- Günstig: Inklusive aller Zusatzreagenzien wie Proteinase K, gDNA-Säulchen/ DNaseI für gDNA-freie Präparationen & RNA-Protection Reagent
- Exzellente Leistung: Verbesserte Aufreinigung aller RNAs (inkl. small RNAs <200 nt) für einen repräsentativen RNA Pool
- Flexibles Elutionsvolumen: von 30 µl für hochkonzentrierte RNA (bei ca. 80% Ausbeute) bis 100 µl für 100%ige Elution
- Vielfältig: RNA kompatibel mit allen nachfolgenden Methoden inkl. RNA-Seq, cDNA, qPCR & RT-qPCR, Northern-Blots etc.
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„Currently, a severe but small ssRNA-based plant pathogen, the citrus bark cracking viroid, is threatening hop production in Europe. Since the viroid was discovered in Germany in 2019, we are supporting the viroid monitoring and conducting degradation studies. Therefore, we needed reliable and efficient RNA extractions and compared several extraction protocols including expensive soil extraction kits. Only the Monarch Total RNA Miniprep Kit let to successful RNA extraction in all cases, thus allowing viroid detection from difficult matrices as plant residues, silage, biogas slurry, compost, and even terpenoid-rich fruit skin.“ Dr. Michael Helmut Hagemann, Researcher at the University of Hohenheim, Stuttgart Germany |
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Wie bei allen Monarch Kits wurde auch bei der Entwicklung des Monarch Total RNA Miniprep Kits besonders auf minimalen Umwelteinfluss geachtet
Wir erreichen dies durch den Einsatz besonders dünnwandiger Säulchen und Flaschen. So reduzieren wir den Einsatz von Kunststoff und damit das Müllaufkommen im Labor. Zudem sind alle Komponenten der Verpackung aus recyceltem Material hergestellt.
Für eine maximale Ausbeute Ihrer RNA Extraction empfehlen wir die Elution in 50-100 µl Nuklease-freiem Wasser. Höher konzentrierte RNA-Proben erhalten Sie aber auch mit weniger Volumen:
30 µl reichen für über 80% Ausbeute.
Gesamt RNA aus diversem Probenmaterial wurde mittels Monarch Total RNA Miniprep Kit (NEB #T2010) präpariert und per Agilent® Bioanalyzer® 2100, Nano 6000 RNA Chip analysiert (S. cerevisiae RNA mit Plant Nano Assay). Die RIN Werte und OD-Verhältnisse bestätigen die hohe Integrität und Reinheit der RNA. Die Kompatibilität mit nachfolgenden Anwendungen wurde getestet: A) RT-PCR (+/- RT) zum Nachweis von 4 RNA-Spezies mit Protoscript® II Reverse Transcriptase (NEB #M0368)/LongAmp® Taq DNA Polymerase (NEB #M0323), B) NGS Library Prep mit NEBNext® Ultra™ II RNA Library Prep Kit (NEB #E7760) und C) RT-qPCR mit Luna® Universal One-Step RT-qPCR Kit (NEB #E3005).
Vergleich von Transkriptionsniveaus in humaner Referenz-RNA (UHRR, Agilent) vor und nach wiederholter Aufreinigung mit Qiagen RNeasy® und Monarch Total RNA Miniprep Kit. Die Proben zeigen nach Reinigung eine starke Korrelation zur Ausgangsprobe UHRR (Pearson R > 0.99 in beiden Experimenten). Die Proben decken alle Transkripte vollständig von Anfang bis Ende ab ohne Zeichen von Degradation während der Aufreinigung. RNA NGS-Libraries wurden dann aus jeweils 100 ng Gesamt RNA mittels poly-A Anreicherung (NEBNext Poly(A) mRNA Magnetic Isolation Module, NEB #E7490) und NEBNext Ultra II Directional RNA Library Prep Kit for Illumina® (NEB #E7760) erstellt und auf Illumina Miseq® sequenziert (2×150 bp). 1,6M Reads aus jeder Library wurden zufällig ausgewählt und Adapter getrimmt (Seqprep v1.1). Die Expressionsniveaus aller Gencode v26 Transkripte wurde mittels Salmon (0.4) ermittelt und geplottet (Abb. A). Mittlere 5′-3′ Abdeckung der Gencode v26 Transkripte ist in Abb. B dargestellt (ermittelt durch Picard’s CollectRnaSeqMetrics 1.56 nach mapping auf GRCh38 Referenzgenom mit Hisat v2.0.3 und Markierung von Duplikaten durch Picard’s MarkDuplicates 1.56 )
Erhältliche RNA Isolation Produkte:
| PRODUKT | Art. # | GRÖSSE | INFO | ||
|---|---|---|---|---|---|
| Monarch™ Total RNA Miniprep Kit | T2010S | 50 preps |  |
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| Säulchen separat erhältlich: | |||||
| Monarch™ RNA Purification Columns | T2007L | 100 preps | |
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| Monarch™ gDNA Removal Columns | T2017L | 100 preps | |
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| Monarch™ Collection Tubes II | T2018L | 100 preps | |
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| Puffer & Reagenzien separat erhältlich: | |||||
| Monarch™ DNA/RNA Protection Reagent | T2011L | 56 ml | |
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| Monarch™ RNA Lysis Buffer | T2012L | 100 ml | |
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| Monarch™ RNA Priming Buffer | T2013L | 56 ml | |
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| Monarch™ RNA Wash Buffer | T2014L | 50 ml | |
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| Monarch™ Total RNA Miniprep Enzyme Pack | T2019L | 1 pack | |
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| Nuclease-free Water | B1500S | 25 ml | |
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| B1500L | 4×25 ml | |
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| Für die isolierung von poly(A)+ mRNA aus Gesamt-RNA: | |||||
| NEBNext® Poly(A) mRNA Magnetic Isolation Module | E7490S | 24 reactions | |
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| E7490L | 96 reactions | |
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Stand: 01.01.2024
Weiterführende Informationen finden Sie unter Technische Ressourcen oder auf neb.com. Informationen zu Namensrechten finden Sie hier.
