Das IMPACT (Intein Mediated Purification with Affinity Chitin-binding Tag) System ist ein einzigartiges Protein-Expressions- / Aufreinigungssystem für E. coli, welches die induzierbare spezifische Autoproteolyse-Aktivität eines Inteins ausnutzt. Bei diesem Protein-Spleißen wird ein bestimmter Bereich aus einem Precursor-Protein (in Analogie zur mRNA-Reifung „Splicing” genannt) entfernt. Das IMPACT System nutzt dieses Protein-Spleißen zur Separation eines beliebigen Zielproteins von einem Affinitätstag.
Ihr Zielprotein wird durch die Expression mit den IMPACT-Vektoren mit einem Intein und einer Chitin-bindenden Domäne fusioniert, welche die affinitätschromatographische Reinigung auf einer Chitin-Säule ermöglicht.
Durch die Zugabe eines Thiols z.B. DTT, 2-Mercaptoethansulfonat-Natrium (MESNA) oder Cystein, wird die spezifische selbstspleißende Aktivität des Inteins induziert und erlaubt eine Elution des nativen Zielproteins (ohne Modifikationen oder zusätzliche Aminosäurereste), während der Affinitäts-Tag auf der Säule verbleibt. So wird eine Reinigung nativer, rekombinanter Zielproteine durch eine “one-step” Affinitäts- chromatographie möglich – ohne Zugabe von Proteasen!
Erhältliche IMPACT Produkte:
| PRODUKT | Art.Nr.: | GRÖSSE | INFO | |
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| IMPACT Kit | E6901S | 1 Kit |  |
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| Chitin Resin | S6651S | 20 ml | |
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| Chitin Resin | S6651L | 100 ml | |
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| Chitin Magnetic Beads | E8036S | 5 ml | |
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| pTWIN1 Vector DNA | N6951S | 10 µg | |
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| pTXB1 Vector DNA | N6707S | 10 µg | |
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| pTYB21 Vector | N6709S | 10 µg | |
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| Anti-CBD Monoclonal Antibody | E8034S | 0,05 ml | |
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Stand 03.01.2024
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