IMPACT – Proteinexpression und Aufreinigung

Das IMPACT (Intein Mediated Purification with Affinity Chitin-binding Tag) System ist ein einzigartiges Protein-Expressions- / Aufreinigungssystem für E. coli, welches die induzierbare spezifische Autoproteolyse-Aktivität eines Inteins ausnutzt. Bei diesem Protein-Spleißen wird ein bestimmter Bereich aus einem Precursor-Protein (in Analogie zur mRNA-Reifung „Splicing” genannt) entfernt. Das IMPACT System nutzt dieses Protein-Spleißen zur Separation eines beliebigen Zielproteins von einem Affinitätstag.

Ihr Zielprotein wird durch die Expression mit den IMPACT-Vektoren mit einem Intein und einer Chitin-bindenden Domäne fusioniert, welche die affinitätschromatographische Reinigung auf einer Chitin-Säule ermöglicht.

Impact Proteinexpression Purification

Durch die Zugabe eines Thiols z.B. DTT, 2-Mercaptoethansulfonat-Natrium (MESNA) oder Cystein, wird die spezifische selbstspleißende Aktivität des Inteins induziert und erlaubt eine Elution des nativen Zielproteins (ohne Modifikationen oder zusätzliche Aminosäurereste), während der Affinitäts-Tag auf der Säule verbleibt. So wird eine Reinigung nativer, rekombinanter Zielproteine durch eine „one-step“ Affinitäts- chromatographie möglich – ohne Zugabe von Proteasen!

Erhältliche IMPACT Produkte:

PRODUKT Art.Nr.: GRÖSSE PREIS
IMPACT Kit E6901S 1 Kit 398 € NEB Shop_icon NEB Info_icon
Chitin Resin S6651S 20 ml 90 € NEB Shop_icon NEB Info_icon
Chitin Resin S6651L 100 ml 360 € NEB Shop_icon NEB Info_icon
Chitin Magnetic Beads E8036S 5 ml 125 € NEB Shop_icon NEB Info_icon
Chitin Magnetic Beads E8036L 25 ml 500 € NEB Shop_icon NEB Info_icon
pTWIN1 Vector DNA N6951S 10 µg 114 € NEB Shop_icon NEB Info_icon
pTXB1 Vector DNA N6707S 10 µg 120 € NEB Shop_icon NEB Info_icon
pTYB21 Vector N6709S 10 µg 120 € NEB Shop_icon NEB Info_icon
Anti-CBD Monoclonal Antibody E8034S 0,05 ml 71 € NEB Shop_icon NEB Info_icon

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