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PURExpress – Zell-freie Proteinexpression

Zell-freie Proteinsynthese mit dem PURExpress® In vitro Protein Synthesis Kit

Schneller geht‘s nicht – mit den PURExpress in vitro Protein Synthesis Kits erhalten Sie in nur 1 – 2 Stunden ausgehend vom ORF das korrespondierende translatierte Protein für analytische Studien oder weitere Aufreinigung!

Das PURExpress® In vitro Protein Synthesis Kit ist ein zellfreies Transkriptions-/Translationssystem und besteht aus definierten, rekonstituierten und hochreinen Komponenten des E. coli Transkriptions-/Translationsapparates.

Schneller & bequemer geht‘s nicht

Alle Proteinfaktoren sind rekombinant als His-tag Fusion hergestellt, die Ribosomen und tRNAs sind hochrein aus E. coli präpariert. Dadurch ist das System frei von kontaminierenden Exonukleasen, RNasen und Proteasen. Zur Expression mischen Sie einfach Lösung A und Lösung B und geben Ihre Template-DNA (als PCR-Produkt oder als Plasmid) dazu – fertig!

Ihre Vorteile:
  • Zuverlässig: Definiertes System mit rekombinanten, hochreinen Komponenten zur Produktion Ihres Zielproteins ohne Abbau und Modifikation
  • Schnell: in wenigen Stunden vom Gen zum Protein
  • Vielseitig: erlaubt die Produktion von zell-toxischen Proteinen

Auch für „schwierige“ oder toxische Proteine

Bei unseren verschiedenen „Delta“-Kits haben Sie weitere experimentelle Möglichkeiten: Hier verwenden Sie z.B. Ihre eigenen Ribosomen-Präparationen, oder Sie geben modifizierte Aminosäuren oder tRNA zum Ansatz zur Herstellung von markierten Proteinen.

Bei gefalteten Proteinen mit Schwefelbrücken empfehlen wir die Zugabe des PURExpress Disulfide Bond Enhancer (PDBE).

Unabhängig von Wirtszellen

Das PURExpress System macht Sie unabhängig von Wirtszellen und ist sowohl für das akademische Einzelexperiment als auch für Hochdurchsatz-Plattformen ideal.

Dank der „kontaminationsfreien“ und reproduzierbaren Umgebung können Sie die Aktivität Ihres Zielproteins in einem nachfolgenden Assay direkt und ohne Aufreinigung messen.

Und falls Sie doch aufreinigen möchten:
Alle Protein-Komponenten des PURExpress Systems enthalten His-Tags für eine einfache IMAC. So fischen Sie bequem alle Protein-Komponenten des PureExpress Systems raus und Ihr Zielprotein fliesst durch.

Expression und Aufreinigung von DHFR (A) und T4 DNA Ligase (B) mit PURExpress. 125 μl Reaktionen wurden nach Protokoll  durchgeführt. Die Samples wurden in einem  10-20% Tris-Glycin-Gel mittels SDS-PAGE aufgetrennt und mit Coomassie angefärbt. Die roten Punkte markieren das jeweilige „Protein of Interest“.  In beiden Fällen befindet sich das Wunschprotein in der Gesamtproteinfraktion. Marker M: Protein Ladder #P7703

Produkttabelle

PRODUKT Art. # GRÖSSE PREIS
PURExpress® In vitro Protein Synthesis Kit E6800S 10 rxns 261 € In den Shop wechseln Produktinformationen
E6800L 100 rxns 2.292 € In den Shop wechseln Produktinformationen
PURExpress® Delta Ribosome Kit E3313S 10 rxns 350 € In den Shop wechseln Produktinformationen
PURExpress® Delta (aa, tRNA) Kit E6840S 10 rxns 350 € In den Shop wechseln Produktinformationen
PURExpress® Delta RF123 Kit E6850S 10 rxns 358 € In den Shop wechseln Produktinformationen
Passend dazu:
PURExpress® Disulfide Bond Enhancer E6820S 50 rxns 242 € In den Shop wechseln Produktinformationen
E. coli Ribosome P0763S 1 mg 182 € In den Shop wechseln Produktinformationen
Murine RNase Inhibitor M0314S 3.000 units 71 € In den Shop wechseln Produktinformationen
M0314L 15.000 units 284 € In den Shop wechseln Produktinformationen

Stand: 03.01.2019

Licenses/Patents/Disclaimers: PURExpress® is based on the PURE System Technology originally developed by Dr. Takuya Ueda at the University of Tokyo and commercialized as the PURESYSTEM® by BioComber (Tokyo, Japan).

Licensed from BioComber (Tokyo, Japan) under Patent Nos. 7,118,883; WO2005-105994 and JP2006-340694. For research use only. Commercial use of PURExpress® Δ Ribosome Kit requires a license from New England Biolabs, Inc.

Protein Expression und Purification Selection Chart

Application Kit Advantages
High-Yield Expression pMAL™ Protein Fusion and Purification System Substantial yields (up to 100 mg/L) in more than 75% cases tested; uses the strong Ptac promoter.
K. lactis Protein Expression Kit Uses the strong LAC4 promoter; multiple integrations of plasmid results in higher yield.
IMPACT™ Kit Uses the T7 promoter for high level regulated expression.
Cell-Free Expression PURExpress® In Vitro Protein Synthesis Kit Quickly generates analytical amounts of protein.
Co-Expression of Multiple Proteins K. lactis Protein Expression Kit Easily co-express 2–4 proteins.
PURExpress® In Vitro Protein Synthesis Kit Bicistronic constructs or multiple plasmids with appropriate transcription and translation regulatory elements can be used.
Enhanced Solubility pMAL™ Protein Fusion and Purification System Fusion to MBP enhances solubility of proteins in E. coli.*
K. lactis Protein Expression Kit Utilizes K. lactis eukaryotic folding pathway.
Affinity Tag Chromatography IMPACT™ Kit Utilizes an intein-chitin binding domain (CBD) tag on either the N- or C- terminus, offering single-step purification.
pMAL™ Protein Fusion and Purification System Fusion to MBP allows for purification on amylose resin.
K. lactis Protein Expression Kit Vectors are sold separately that generate fusions to MBP allowing for purification on amylose restin.
Post-translational Modification K. lactis Protein Expression Kit Secretion of both N- and O- glycosylated proteins.
Periplasmic Expression pMAL™ Protein Fusion and Purification System Periplasmic expression enhances folding of proteins with disulfide bonds.
Secreted Expression K. lactis Protein Expression Kit Eliminates cell lysis step, simplifying purification.
Toxic Proteins K. lactis Protein Expression Kit Secretion of protein from the cell.
IMPACT™ Kit Can express the toxic gene in two pieces and ligate proteins together using intein mediated protein ligation (IPL).
pMAL™ Protein Fusion and Purification System Can export toxic proteins into periplasmic space.
PURExpress® In Vitro Protein Synthesis Kit Cell-free environment not affected by „toxicity“ of expressed protein.
Protein Modification IMPACT™ Kit Generates proteins with reactive ends (N-terminal cysteine and/or C-terminal thioester) allowing for labeling or ligation of proteins or peptides.
PURExpress® In Vitro Protein Synthesis Kit Allows introduction of modified, unnatural or labeled amino acids.
No Additional Amino Acid Residues IMPACT™ Kit Start of native protein is fused adjacent to site of intein cleavage.
pMAL™ Protein Fusion and Purification System Start of protein is fused adjacent to protease site.

Weiterführende Informationen finden Sie unter Technische Ressourcen oder auf neb.com. Informationen zu Namensrechten finden Sie hier.