Genome Editing CRISPR Cas9

EnGen Mutation Detection Kit

Überprüfung der Genome Targeting Effizienz

Das EnGen Mutation Detection Kit enthält alle notwendigen Reagenzien, um den Erfolg Ihres Genome Editings zu quantifizieren. Zuerst amplifizieren Sie den editierten DNA-Bereich durch „ultra-fidelity PCR“ mit dem im Kit enthaltenen Q5 Hot Start High-Fidelity 2X Master Mix. Die Amplifikate werden dann Hitze-denaturiert und langsam abgekühlt, sodass mutierte und Wildtyp-Einzelstränge Heteroduplexe ausbilden. Im anschließenden Verdau mit der strukturspezifischen EnGen T7 Endonuclease I werden dabei ausschliesslich Heteroduplexe geschnitten. Der Anteil geschnittener DNA ist somit proportional zur Effizienz des Genome Editings und ein einfacher und schneller Indikator.

Das Kit wurde für Sie auf kurze Arbeits- und Reaktionszeiten optimiert: Nach der PCR können Sie ohne Reinigungsschritt mit der Denaturierung fortfahren und der direkt anschließende Verdau ist bereits nach 15 Minuten vollständig.

Schließlich komplettieren wir das Kit für Sie mit einem DNA-Template und Primern für eine parallele Kontroll-Reaktion.

EnGen

Genomic DNA is amplified with primers bracketing the modified locus. PCR products are then denatured and re-annealed yielding three classes of possible structures. Duplexes containing a mismatch greater than one base are digested by T7 Endonuclease I. The DNA is then electrophoretically separated and fragment analysis is used to estimate targeting efficiency.

Produkttabelle

PRODUKT Art. # GRÖSSE PREIS
EnGen® Mutation Detection Kit E3321S 25 rxns 210 € In den Shop wechseln Produktinformationen

Stand: 03.01.2019

Weiterführende Informationen finden Sie unter Technische Ressourcen oder auf neb.com. Informationen zu Namensrechten finden Sie hier.