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PCR / DNA Amplifikation

In der Molekularbiologie ist es häufig notwendig bestimmte Nukleinsäure-Fragmente in großen Mengen herzustellen.

Die Polymerasekettenreaktion (PCR) ist die am häufigsten verwendete Methode zur DNA-Vervielfältigung. New England Biolabs bietet eine große Auswahl von DNA-Polymerasen für unterschiedliche Anwendungsgebiete dieser Methode an. So hat NEB der Forschergemeinde die erste, kommerziell erhältliche Taq DNA Polymerase verfügbar gemacht. Auch die Entdeckung einer thermostabilen, „high-fidelity“ DNA-Polymerase geht auf das Konto von NEB-Wissenschaftlern.

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Die neuesten Errungenschaften auf diesem Gebiet sind die OneTaq® DNA Polymerase, eine sehr robuste Polymerase für Standard-Anwendungen, und die Q5® High-Fidelity DNA Polymerase, welche sich durch herausragende Genauigkeit (~280-fach genauer im Vergleich zu Taq DNA Polymerase) auszeichnet. Bei der Entwicklung beider Polymerasen wurde auch insbesondere die Anwendungsfreundlichkeit bedacht. So können beide leicht an verschiedene Targets, z.B. mit extremen GC/AT-Verhältnissen, angepasst werden.

New England Biolabs hat für Sie die neuen Luna Universal qPCR Produkte für zuverlässige Performance auf diversen Proben und Zielsequenzen entwickelt. Wir nutzen dabei die neuste Enzymtechnologie – ganz auf Höhe der Zeit. Sie finden kinderleicht das richtige Reagenz für Ihre Experimente: verfügbar für Farbstoff- wie für Sonden-basierte Detektion sind Luna Universal qPCR & RT-qPCR Produkte kompatibel mit allen gängigen Plattformen.

Nutzen Sie unsere kosteneffizienten Luna Produkte und erhalten Sie die Sensitivität, Spezifität und Zuverlässigkeit, die Sie vom aktuellsten und klassenbesten Reagenz erwarten dürfen.

Für bestimmte Anwendungen, z.B. in der Patienten-nahen Labordiagnostik oder im mobilen Einsatz vor Ort, ist die PCR manchmal jedoch nicht die beste Methode. Hier bieten sich isothermale Amplifikations-Methoden an, da diese ohne die für die PCR notwendigen Apparaturen auskommen.
Hier macht man sich typischerweise eine Eigenschaft bestimmter DNA-Polymerasen zu Nutze, die sogenannte Strand Displacement-Aktivität. Dabei verdrängt die Polymerase, typischerweise Bst DNA Polymerase, Large Fragment während der DNA-Synthese den DNA-Gegenstrang der Matrizen-DNA, so dass eine Denaturierung der DNA wie bei der PCR nicht notwendig ist.

Auch für diese Methoden entwickelt NEB die Werkzeuge ständig weiter und hat kürzlich die Serie der in-silico-entworfenen und funktionsoptimierten Bst 3.0 , 2.0 und  Bst 2.0 WarmStart® DNA Polymerasen veröffentlicht, welche sich unter anderem durch höhere Zuverlässigkeit sowie Thermostabilität auszeichnen.

Videos

Weitere Informationen zum Thema PCR / DNA Amplifikation erhalten Sie in unseren Videos.

Important Tips for Working with Q5 Polymerase
Are you using Q5® High-Fidelity DNA Polymerase? Then you probably already know how robust and accurate the DNA amplification is (greater than 100X Taq DNA Polymerase). Melanie has some tips for ensuring optimal performance with Q5. If you haven't tried Q5 for your high-fidelity amplification yet, what are you waiting for?
How to Amplify GC-rich DNA
Amplification of GC-rich DNA can be challenging with traditional DNA polymerases. NEB offers a range of DNA polymerase formulations optimized for the amplification of GC-Rich DNA. In this video Senior Applications Scientist Nicole Nichols explains which products to choose for routine amplification, high-fidelity amplification, and next generation sequencing applications depending on the base content of your target amplicon.
Why Choose Q5 High-fidelity Polymerase?
Q5® High-Fidelity DNA Polymerase sets a new standard for both fidelity and robust performance across the GC spectrum. With the highest fidelity amplification available (more than 100 times higher than Taq), Q5 DNA Polymerase results in ultra-low error rates. Q5 DNA Polymerase is composed of a novel polymerase that is fused to the processivity-enhancing Sso7d DNA binding domain, improving speed, fidelity and reliability of performance. In this video Senior Applications Scientist Nicole Nichols explains which Q5 formulation is optimal for your specific PCR application.
How to Choose the Right DNA Polymerase for PCR
Choosing the correct DNA polymerase for PCR depends on many factors. NEB offers a range of DNA polymerase formulations optimized for different applications. In this video Product Marketing Manager Fiona Stewart explains which products to choose for routine amplification, high-fidelity amplification, and next generation sequencing applications depending on the base content of your target amplicon. To choose the right DNA polymerase for your application please visit our PCR selection tool

Informationsmaterial

Die unten aufgeführten Broschüren können Sie gerne kostenfrei anfordern oder nutzen Sie unseren PDF-Download.

Cover

PCR Reagents – Polymerases, Nucleotides & DNA Ladders

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Q5® High-Fidelity DNA Polymerase – Fidelity at its finest

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Luna Universal qPCR & RT-qPCR – Lighting the way

Icon Cover

Isothermal DNA Amplification – Rapid Nucleic Acid Detection

Weiterführende Informationen finden Sie unter Technische Ressourcen oder auf neb.com