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Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit: Ideal für den Nachweis von Virus-RNA!

One-Step RNA Nachweis und Quantifizierung

Das NEB Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit #E3006 ist ein praktischer und zuverlässiger 2x Master Mix, der für die Detektion und Quantifizierung von RNA-Sequenzen mit Hydrolyse-Sonden (z. B. „TaqMan“ Sonden) optimiert wurde. Das Kit enthält alle notwendigen Enzyme und Komponenten, um besonders einfach ausgehend von RNA zuverlässige qPCR-Daten zu generieren: d.h. Sie geben einfach RNA Template, gen-spezifische Primer & Hydrolyse-Sonde und Wasser zum Master Mix –  fertig ist der Ansatz!

Dank der einfachen und schnelle Protokolle ist der Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit optimal für die Forschung und auch in der Routine-Analyse z. B. Quantifizierung von viraler RNA etc.

Und das passiert im Reagenzgefäß:

In der 1-Tube Reaktion wird die RNA zunächst durch die einzigartige, von NEB neu entwickelte „WarmStart“ Reverse Transcriptase des Master Mixes in cDNA umgeschrieben. Für die anschließende Amplifikation mit spezifischen Primern nutzt der Master Mix eine RT-qPCR optimierte Formulierung unserer Hot Start Taq DNA Polymerase.

Den Reaktionsansatz können Sie gefahrlos bei Raumtemperatur (RT) pipettieren, denn beide Enzyme werden durch reversibel bindenden Aptamere bei niedrigen Temperaturen (RT) inhibiert. So wird die unerwünschte unspezifische Reverse Transkription sowie die unspezifische PCR-Amplifikation inhibiert und dadurch die Spezifität der gesamten RT-qPCR deutlich erhöht.

Ihre Vorteile:
  • Entwickelt entlang der renommierten MIQE-Richtlinien für beste qPCR-Praxis
  • Modernste Enzymtechnologie für beste Performance, Sensibilität und Zuverlässigkeit in der One-Step RT-qPCR
  • Einfache und schnelle Protokolle dank umfassendem Master Mix Format
  • Reaktionsansatz bei Raumtemperatur
  • Gut sichtbarer inerter blauer Farbstoff als Schutz vor Pipettierfehlern
  • Kompatibel mit allen gängigen PCR-Maschinen
  • Ideal für Routine-Analysen, da kompatibel mit optionalem Verdau von Übertragskontaminationen durch thermolabile UDG
  • Günstiger Preis

Das NEB Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit #E3006 enthält ebenfalls einen innovativen Referenz-Farbstoff. Damit ist das Kit mit allen gängigen qPCR Instrumenten kompatibel, inkl. solche, die High oder Low ROX benötigen.

Schutz vor Carryover-Kontamination:

Der Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit nutzt einen dNTP-Mix, der dUTP enthält. Dies ermöglicht einen optionalen Uracil DNA Glycosylase (UDG) Verdau vor der Nachweis-Reaktion, mit dem alte, „kontaminierende“ Amplifikate abgebaut werden. Dieser Schutz von Carryover-Kontaminationen ist besonders sinnvoll, wenn viele Proben routine-mäßig auf die gleiche Sequenz überprüft werden.

Verschiedene kommerziell erhältliche RT-qPCR-Reagenzien wurden mit 7 RT-qPCR-Targets getestet, die sich in Abundanz, Länge und GC-Gehalt unterschieden. Die Reaktionen wurden gemäß den Empfehlungen des jeweiligen Herstellers durchgeführt. Die Ergebnisse wurden hinsichtlich der Effizienz, Nachweis bei geringer Input-Menge und Signal in der Non-Template Control (NTC) ausgewertet (ΔCq = durchschnittlicher Cq der NTC – durchschnittlicher Cq der niedrigsten Input-Menge). Zusätzlich wurden Gleichmäßigkeit, Reproduzierbarkeit und die Qualität der Gesamtkurve bewertet (Quality Score). Das Balkendiagramm zeigt den Prozentsatz der Targets an, die die akzeptablen Leistungskriterien erfüllten (angezeigt durch ein grünes Kästchen auf dem Punktdiagramm und den Qualitätswert > 3). Es werden Ergebnisse für NEB und andere Lieferanten gezeigt: Quanta – qScript XLT 1-Step RT-qPCR ToughMix; ABI – TaqMan RNA-to-Ct 1-Step Kit; QIAGEN – QuantiFast Probe RT-PCR Kit; Bio-Rad – iTaq Universal Probes One-Step Kit; Promega – GoTaq Probe 1-Step RT-qPCR System. Das Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit von NEB übertraf alle anderen getesteten Reagenzien.

Multiplex One-Step RT-qPCRs an humaner GAPDH, Ribosomal Protein L32g und PI3-Kinase-Related Kinase SMG1 belegen die exzellente Performance des Luna Universal One-Step RT-qPCR Kits. Es wurden dabei RNA-Eingangsmengen über 7 Größenordnungen (1 μg – 1 pg Jurkat total RNA) in jeweils 4 Replikaten eingesetzt.

Produkttabelle

PRODUKT Art. # GRÖSSE PREIS
Luna® Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit E3006S 200 rxns 198 € In den Shop wechseln Produktinformationen
E3006L 500 rxns 448 € In den Shop wechseln Produktinformationen
E3006X 1000 rxns 788 € In den Shop wechseln Produktinformationen
E3006E 2500 rxns 1.738 € In den Shop wechseln Produktinformationen

Stand: 03.01.2020

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