LunaScript RT SuperMix Kit – mit Designer RTase zu unerreichter 2-Schritt RT-qPCR Performance

Die 2-Schritt-RT-qPCR ist eine flexible Alternative zur deutlich schnelleren 1-Schritt-RT-qPCR: Das zeitliche Entkoppeln der cDNA-Synthese von der qPCR kann für Forscher vorteilhaft sein, da die gewonnene cDNA archiviert und für weitere Analysen verwendet werden kann. Auch kann es vorteilhaft sein, wenn man verschiedene cDNA-Syntheseansätze für „schwierige“ RNAs mit Sekundärstrukturen oder sehr geringen RNA-Mengen vorbereitet.

Für den cDNA-Synthese-Schritt in Ihren 2-Schritt-RT-qPCRs empfehlen wir Ihnen den neuen LunaScript RT SuperMix: Dieser Mix enthält ein für diese Anwendung hin maßgeschneidertes, neuartiges in silico Designer-Enzym – die LunaScript Reverse Transkriptase – das besonders schnell und zuverlässig auf quasi allen RNAs und Input-Mengen bei erhöhten Temperaturen arbeitet. Im Zusammenspiel mit dem im Mix enthaltenen optimierten Puffer, dNTPs, RNase Inhibitor und den Random-Hexamer- und poly d(T)-Primer des Mixes generieren Sie exzellente, vollständige cDNAs.
Sie erhalten somit Best-in-Class-Performance und besonders einfache und Anwender-freundliche Protokolle. Der inerte blaue Farbstoff des Mixes hilft Ihnen dabei, Pipettierfehler zu vermeiden.
Unser LunaScript RT SuperMix wurde ausgiebig auf allen gängigen Plattformen und in Kombination mit unseren Luna® Universal qPCR Master Mixes getestet.

Das Ergebnis: exzellente Sensitivität und extrem genaue, lineare Quantifizierungen von allen RNAs und Input-Mengen!

Ihre Vorteile:
  • Einfacher, Anwender-freundlicher Reaktionsansatz dank SuperMix-Format mit allen notwendigen Reagenzien
  • Einzigartige neuartige Designer-RTase optimiert für anschließende qPCR
  • Bislang unerreichter Performance
  • Schnellste cDNA-Synthese in <15 min
  • Problemlose Analyse von RNAs mit Sekundärstrukturen dank erhöhter Reaktionstemperatur von 55 °C (bis 65°C)
  • Inerter blauer Farbstoff im SuperMix schützt vor Pipettierfehlern
  • Ausgiebig getestet auf allen gängigen qPCR Plattformen
  • Exzellente Sensitivität, Linerarität und Zuverlässigkeit

Nutzen Sie den LunaScript SuperMix zusammen mit den Luna Universal qPCR Master Mixes für besonders zuverlässige RT-qPCR.

Der LunaScript RT SuperMix Kit bietet Ihnen die schnellste Erststrang-cDNA-Synthese!

LunaScript im Vergleich zu anderen RT-Systemen

Vergleich der Herstellerempfehlungen für cDNA-Synthese. Der LunaScript RT SuperMix Kit ermöglicht Ihnen die schnellsten und kürzesten Protokolle und toleriert die höchsten Temperaturen, die zum sicheren Aufschmelzen inhibierender RNA-Sekundärstrukturen benötigt werden.

Der LunaScript RT SuperMix Kit bietet Ihnen unerreichte Sensitivität, Linearität und Reproduzierbarkeit in 2-Schritt-RT-qPCR Prozessen.

RNA wurde mit dem  1X LunaScript RT SuperMix in 20 μl Ansätzen unter den empfohlenen „Standard“ Bedingungen zu cDNA umgeschrieben (25°C/2 min, 55°C/10 min, 95°C/1 min). Die gewonnene cDNA wurde anschließend mit dem Luna Universal qPCR Master Mix (NEB #M3003) und 1 μl der cDNA quantifiziert, jeweils in Triplikaten.
A. Input = Verdünnungsreihe mit Jurkat total RNA (1 μg – 1 pg) umgeschrieben in cDNA und anschließende Quantifizierung des
β-actin-Gentranskripts mittels qPCR.
B. Input = Verdünnungsreihe mit ERCC (External RNA Controls Consortium) Mix1 RNA (5×10^9 bis 50 Kopien, entsprechend ~10 ng bis 10 fg) umgeschrieben in cDNA und anschließende Quantifizierung des Transkripts ERCC-00130 mittels qPCR.

Der LunaScript RT SuperMix Kit ist der Konkurrenz in Zuverlässigkeit und Linearität auf allen getesteten RNAs deutlich überlegen

Kommerziell erhältliche cDNA Synthese Supermixe wurden nach Empfehlung des Herstellers eingesetzt, um cDNA von 1 μg – 100 pg humaner (Jurkat) Gesamt-RNA zu generieren.Die resultierenden cDNAs von 8 unterschiedlichen Targets (variierend in Menge, Länge und GC-Gehalt) wurden anschließend per qPCR mit dem Luna Universal qPCR Master Mix (NEB #M3003) bzw. Luna Universal Probe qPCR Master Mix (NEB #M3004) untersucht. Die Effizienz der Reaktionen sowie der ΔCq wurden analysiert, (ΔCq = durchschnittlicher Cq der NTC  (no template control) – durchschnittlicher Cq der geringsten Input-Menge). Die grüne Box markiert exzellente Performance nach den folgenden Kriterien: Effizienz = 90-110%, ΔCq ≥ 3). Weitere Informationen zu der „Dots in Boxes“ Darstellungen finden Sie hier.

Produkttabelle

PRODUKT Art. # GRÖSSE PREIS
LunaScript RT SuperMix Kit E3010S 25 rxns 125 € In den Shop wechseln Produktinformationen
E3010L 100 rxns 420 € In den Shop wechseln Produktinformationen
Luna® Universal qPCR Master Mix M3003S 200 rxns (2x1ml) 105 € In den Shop wechseln Produktinformationen
M3003L 500 rxns (5x1ml) 237 € In den Shop wechseln Produktinformationen
M3003X 1000 rxns (10x1ml) 424 € In den Shop wechseln Produktinformationen
M3003E 2500 rxns (1x25ml) 948 € In den Shop wechseln Produktinformationen
Luna® Universal Probe qPCR Master Mix M3004S 200 rxns (2x1ml) 88 € In den Shop wechseln Produktinformationen
M3004L 500 rxns (5x1ml) 198 € In den Shop wechseln Produktinformationen
M3004X 1000 rxns (10x1ml) 364 € In den Shop wechseln Produktinformationen
M3004E 2500 rxns (1x25ml) 812 € In den Shop wechseln Produktinformationen
Luna® Universal One-Step RT-qPCR Kit E3005S 200 rxns 218 € In den Shop wechseln Produktinformationen
E3005L 500 rxns 496 € In den Shop wechseln Produktinformationen
E3005X 1000 rxns 869 € In den Shop wechseln Produktinformationen
E3005E 2500 rxns 1.924 € In den Shop wechseln Produktinformationen
Luna® Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit E3006S 200 rxns 198 € In den Shop wechseln Produktinformationen
E3006L 500 rxns 448 € In den Shop wechseln Produktinformationen
E3006X 1000 rxns 788 € In den Shop wechseln Produktinformationen
E3006E 2500 rxns 1.738 € In den Shop wechseln Produktinformationen

Stand: 03.01.2019

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